在高效液相色譜儀高效液相分析檢測(cè)樣品的過(guò)程中，色譜柱會(huì)受到來(lái)自于樣品及色譜系統(tǒng)的污染，從而導(dǎo)致色譜柱耐用性差、壽命縮短。

來(lái)自于色譜系統(tǒng)的污染主要指，HPLC儀器系統(tǒng)中部件磨損而產(chǎn)生的固體顆粒，以及流動(dòng)相系統(tǒng)過(guò)濾不完全殘留的固體顆粒。來(lái)自于樣品的污染主要指，未完全溶解的樣品或者已完全溶解的樣品進(jìn)入色譜系統(tǒng)中，由于樣品溶劑和流動(dòng)相溶劑對(duì)樣品溶解存在的溶解度差異，導(dǎo)致沉淀析出污染系統(tǒng)。特別是對(duì)于中藥、天然產(chǎn)物、合成中間體及生物藥品的檢測(cè)，因基質(zhì)的復(fù)雜性，色譜柱受污染的情況會(huì)更加嚴(yán)重。污染會(huì)導(dǎo)致液相色譜儀色譜系統(tǒng)壓力升高、色譜柱塌陷、填料變色等，從而帶來(lái)檢測(cè)成本高，測(cè)試結(jié)果不準(zhǔn)確等各種影響。

以下幾種情況建議使用保護(hù)柱：

1.中藥、天然產(chǎn)物及合成中間體等基質(zhì)較復(fù)雜的樣品分析——因溶解性差異導(dǎo)致樣品析出而污染分析柱的情況比較嚴(yán)重，梯度洗脫時(shí)影響更大。

2.生物樣品分析——因樣品的不可逆吸附導(dǎo)致的污染，保護(hù)柱可先于分析柱承受這種污染，從而延長(zhǎng)分析柱壽命。

保護(hù)柱很重要，但選擇合適的保護(hù)柱更重要，選擇或使用不當(dāng)也可能帶來(lái)截然相反的效果。

保護(hù)柱使用注意事項(xiàng)：

1.獨(dú)立式保護(hù)柱與分析柱連接時(shí)，連接管路盡可能短，且接口切面平滑，盡量減少死體積以降低柱外展寬效應(yīng)。

2.高效液相色譜儀卡套式保護(hù)柱一般未標(biāo)注液流方向，使用時(shí)最好自行標(biāo)注，并按照標(biāo)注方向來(lái)使用，以免正反向使用后，截留的雜質(zhì)污染分析柱。

3.直接填裝的短柱型保護(hù)柱，出現(xiàn)柱壓升高或峰型變差時(shí)，可不接分析柱進(jìn)行反向清洗，清洗溶劑可參考分析柱清洗溶劑。

4.卡套式保護(hù)柱，柱芯替換時(shí)，注意柱芯與柱套是否存在方向上的匹配，同時(shí)不易旋擰過(guò)緊，以防滑絲。

5.保護(hù)柱或柱芯一般不建議超聲清洗，因可能對(duì)填料表面修飾有影響。

6.如同一保護(hù)柱配不同的分析柱使用，每次使用前，保護(hù)柱需先清洗并用流動(dòng)相平衡保護(hù)柱一段時(shí)間后，再接分析柱使用。

高效液相色譜儀保護(hù)柱與柱前過(guò)濾器的區(qū)別和使用：

使用保護(hù)柱的目的在于延長(zhǎng)分析柱的使用壽命，當(dāng)分析柱造價(jià)昂貴時(shí)，保護(hù)柱的價(jià)值尤其能體現(xiàn)，某些情況下，當(dāng)使用的分析柱本身價(jià)格便宜，保護(hù)柱并非必選，推薦使用柱前過(guò)濾器更合適。

柱前過(guò)濾器與保護(hù)柱兩者外形相似，差異主要在于：保護(hù)柱內(nèi)芯裝有填料，而柱前過(guò)濾器內(nèi)芯是可更換的濾片（一般為帶孔的不銹鋼燒結(jié)板）

因此，從結(jié)構(gòu)可以推測(cè)使用上的差異：

柱前過(guò)濾器——通用性強(qiáng)，任何分析柱前都可使用，因其濾芯只起到過(guò)濾和截留雜質(zhì)的作用，濾片污染后可超聲清洗，反復(fù)使用。

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